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SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠小鼠病原檢測(cè)中的熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間： 2026-01-04 點(diǎn)擊次數(shù)： 234次近幾年來(lái),PCR技術(shù)不斷發(fā)展,它以準(zhǔn)確、快速、便捷等優(yōu)點(diǎn)廣泛應(yīng)用在科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。特別是熒光定量PCR技術(shù)，高靈敏、快速、特異性高等特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)大鼠小鼠在基礎(chǔ)生命科學(xué)和藥物學(xué)方面的應(yīng)用極為廣泛，科學(xué)的發(fā)展和更新的研究目標(biāo)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量提出了越來(lái)越高的要求。國(guó)標(biāo)GB14922—2022中明確規(guī)定了大鼠小鼠病原微生物需要排除的項(xiàng)目。這些病原微生物會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康或者實(shí)驗(yàn)結(jié)果。方便快捷的檢測(cè)方式有助于提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和成功率。PCR技術(shù)越來(lái)越多的應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病原微生物的檢測(cè)。
SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GBGB 14922—2022中沙門(mén)氏菌、支原體、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、嗜肺巴斯德桿菌等都是必檢的病原菌。細(xì)菌和真菌的檢測(cè)中,傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)方法需要培養(yǎng)基培養(yǎng)，富集培養(yǎng)、形態(tài)特征觀察、生理生化反應(yīng)以及血清學(xué)鑒定等過(guò)程,操作復(fù)雜、耗時(shí)費(fèi)力,對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的技術(shù)要求也很高。對(duì)于病毒來(lái)說(shuō)，呼腸孤病毒Reo-3、仙臺(tái)病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、漢坦病毒HANT都是必須要排除的病毒。ELISA是病毒檢測(cè)的好方法，但是因?yàn)榭贵w產(chǎn)生相對(duì)滯后，并且對(duì)于免疫缺陷鼠無(wú)法產(chǎn)生抗體，所以需要更靈敏的檢測(cè)方案。目前,越來(lái)越多的研究者使用PCR技術(shù)檢測(cè)這些病原菌和病毒。
熒光定量PCR成為用于檢測(cè)病毒感染的常用的方法。不同的熒光標(biāo)記物也使得多重檢測(cè)成為可能，比如一個(gè)反應(yīng)體系內(nèi)可見(jiàn)檢測(cè)多重?zé)晒釬AM、HEX、ROX 熒光，每種熒光探針標(biāo)記1-3種病毒，從而可以實(shí)現(xiàn)一個(gè)孔中多種病毒的檢測(cè)。
四款聯(lián)檢試劑盒：國(guó)標(biāo)病毒必檢八項(xiàng)、國(guó)標(biāo)病毒選檢六項(xiàng)、國(guó)標(biāo)病原菌必檢八項(xiàng)、國(guó)標(biāo)病原菌選檢七項(xiàng)。聯(lián)檢試劑盒中一個(gè)熒光通道可以同時(shí)檢測(cè) 2-3 種病原體，但是不進(jìn)行具體病原的鑒定，也就是說(shuō)一旦某個(gè)熒光通道有信號(hào)陽(yáng)性，那么該熒光對(duì)應(yīng)的這 2-3 種病原體都有可能是陽(yáng)性。
翼和生物還開(kāi)發(fā)了十款鑒定試劑盒。鑒定試劑盒中一個(gè)熒光通道只鑒定一種病原，所以可以通過(guò)熒光信號(hào)直接判斷感染的具體病原體。
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