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嗜肺巴氏桿菌的PCR檢測(cè)方法
發(fā)布時(shí)間： 2026-02-10 點(diǎn)擊次數(shù)： 205次嗜肺巴氏桿菌的生理特點(diǎn)
嗜肺巴氏桿菌是革蘭氏陰性小桿菌，主要寄居于嚙齒類(lèi)和免類(lèi)的上呼吸道。嗜肺巴氏桿菌是實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠易感染的病原菌，較難通過(guò)有效的方法進(jìn)行排除。嗜肺巴斯德桿菌（Pasteurella pneumotropica）是國(guó)標(biāo)GB14922-2022中SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)大小鼠必須排除的項(xiàng)目之一，是嚙齒類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中重要的巴氏桿菌科物種。嗜肺巴氏桿菌的宿主廣泛，人和嚙齒類(lèi)動(dòng)物均可感染嗜肺巴氏桿菌，感染可能來(lái)自與動(dòng)物的密切接觸或被鼠咬傷。嚙齒類(lèi)動(dòng)物感染嗜肺巴氏桿菌后可不表現(xiàn)出任何病理癥狀。嗜肺巴氏桿菌與其他病原共感染后出現(xiàn)癥狀，如支原體、仙臺(tái)病毒等共同感染，可加重疾病的過(guò)程。
一般來(lái)說(shuō)，嗜肺巴斯德桿菌主要包括兩種生物型：Jawetz型（J型）和Heyl型（H型），另外還有一些其他分離株。近年重新分類(lèi)后，上述兩種類(lèi)型分為：嗜肺嚙齒桿菌（Rodentibacter pneumotropicus，即原嗜肺巴斯德桿菌J型）和 嚙齒桿菌H型（Rodentibacter heylii，即原嗜肺巴斯德桿菌H型）。目前的檢測(cè)方法不對(duì)這兩種類(lèi)型進(jìn)行分類(lèi)。
嗜肺巴氏桿菌的傳統(tǒng)檢測(cè)方法
國(guó)標(biāo)GB/T 14926.12-2001中指出，嗜肺巴氏桿菌是革蘭氏陰性小桿菌，嗜肺巴斯德桿菌具有特殊的生化反應(yīng)，菌體可與相應(yīng)的免疫血清在玻片上形成肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，據(jù)此可進(jìn)行該菌的分離培養(yǎng)和檢測(cè)。
嗜肺巴氏桿菌的qPCR檢測(cè)方法
PCR是基于核酸DNA的檢測(cè)方法，靈敏度高，可在病原檢測(cè)初期檢測(cè)到。應(yīng)用于病原體檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，不需要長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，操作性強(qiáng)，可用于篩查。
翼和生物提供嗜肺巴氏桿菌的PCR檢測(cè)試劑盒，是多重病原同時(shí)檢測(cè)的qPCR試劑盒。多重?zé)晒馔瑫r(shí)檢測(cè)鼠棒狀桿菌Ck、嗜肺巴斯德桿菌Pp、支氣管鮑特桿菌Bb。在必檢病原菌聯(lián)檢試劑盒的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)，用于對(duì)檢出的陽(yáng)性樣本進(jìn)一步確認(rèn)所感染病原菌，當(dāng)然如果研究者懷疑樣本感染了上述三種病原，可直接用該鑒定試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。
本試劑盒采用多套引物探針，在FAM（鼠棒狀桿菌 Ck）、HEX（嗜肺巴斯德桿菌Pp）、ROX（支氣管鮑特桿菌 Bb）三個(gè)通道檢測(cè)3種病原菌，另外1套引物探針在CY5通道檢測(cè)內(nèi)參DNA。該試劑盒具有以下特點(diǎn)：
靈敏：檢測(cè)靈敏度較高，10 CFU可被有效檢出。
穩(wěn)定：全程閉管操作，無(wú)交叉污染。
可靠：含內(nèi)參對(duì)照，避免假陰性。
方便：操作簡(jiǎn)單，一步法檢測(cè)。
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